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El parque Natural Municipal Gruta India está ubicado en el Municipio de Garuhapé, Misiones y tiene por finalidad la conservación de la biodiversidad de la Selva Paranaense y del patrimonio cultural del sitio. Un tramo del arroyo Tres de Mayo atraviesa el área protegida y fue estudiado con el objetivo de determinar la composición, estructura y el estado de conservación de la comunidad íctica. Se realizaron cuatro muestreos estacionales, entre los años 2022 y 2023, con redes de espera monofilamento de 2,5; 3; 4 y 5 cm entre nudos opuestos, y red de arrastre o copo en las zonas de menor profundidad con vegetación flotante o palustre. La diversidad específica estuvo representada por 43 especies pertenecientes a los Ordenes Characiformes, Siluriformes, Gymnotiformes, Cichliformes, Perciformes y Clupeiformes. La diversidad alfa (H’) tuvo un valor de 3 y los estimadores no paramétricos Chao2 y Jackknife1, indicaron que aún restarían por registrar entre 12 y 17 especies. La distribución rango–abundancia evidenció diferencias en la estructura de la comunidad entre los sectores del arroyo, destacando la región potámica por presentar la mayor riqueza específica (33 especies) y abundancia (164 individuos). La similitud entre los puntos de muestreo fue de moderada a baja (2-32%). Siete especies fueron clasificadas como comunes o abundantes, mientras que 29 especies raras se registraron principalmente en sitios influenciados por el río. Se identificaron seis especies endémicas, entre ellas Rhamdella cainguae y Rineloricaria misionera clasificadas como vulnerables según las categorías y criterios de la Lista Roja de la UICN. Estos resultados indican que el arroyo funciona como un refugio importante para la ictiofauna endémica y amenazada, lo que resalta su alto valor ecológico y la necesidad de implementar estrategias de conservación específicas, a escala de cuenca, que aseguren su protección a largo plazo.